一、背景：为何要检测热原
注射用药物（肠外制剂）必须确保不含热原。热原多为细菌来源的成分，进入人体后可引起发热、寒战，严重时甚至导致休克。因此，热原检测是药品质量控制中的关键环节，直接关系到患者用药安全。
自20世纪40年代起，兔热原试验（Rabbit Pyrogen Test，RPT）一直是国际通行的检测方法。该试验通常选用三只兔子，将待测制剂注射入体内，在规定时间内监测动物体温变化。如果体温升高超过设定阈值，则判定为阳性，提示制剂可能含有热原。
二、替代方法的发展：告别动物实验成为可能
随着检测技术的进步，近年来已经出现多种无需使用实验动物的热原检测方法，并在实际应用中逐渐成熟，主要包括：
鲎试剂法，又称鲎阿米巴细胞裂解物试验（LAL），也被称为细菌内毒素检测法（BET），主要用于检测革兰阴性菌内毒素；
单核细胞活化试验（Monocyte Activation Test，MAT），利用人源免疫细胞对热原的反应，更接近人体真实生理反应。
这些方法在灵敏度、可重复性和伦理层面均具有明显优势，已被广泛用于药品质量控制。
三、欧洲药典的重大调整：兔热原试验基本退出历史舞台
鉴于替代方法已充分建立并得到验证，欧洲层面正式对药典内容进行了修订。德国保罗·埃尔利希研究所（Paul-Ehrlich-Institut，PEI）近期通报，欧洲药典委员会在6月会议上决定，在57个药典专论中删除兔热原试验相关要求。
同时，隶属于欧洲药品质量管理局的药品质量与卫生保健署（EDQM）在《欧洲药典》（Ph. Eur.）中新增了第5.1.13章“热原性”，对热原检测的总体原则和替代方法进行了系统规范。这一系列调整被EDQM视为欧洲药典中“兔热原试验时代”的终结。
对于德国市场而言，这意味着：未来在德国上市的相关药品，将不再需要通过兔热原试验来证明其无热原性。
四、是否彻底删除？一个“例外”的说明
值得注意的是，EDQM此前曾评估需要修订的文本共有59项，包括新增的“热原性”章节和58个具体专论。但此次会议仅删除了57个专论中的兔热原试验要求，这表明该试验在药典中并非百分之百消失。
对此，PEI在回应专业媒体咨询时解释称，剩余的相关文本属于“非常特殊的例外”，与德国市场上销售的药品无关。因此，从实际监管和临床应用角度来看，这一“遗留条款”不会影响德国药品生产和质量检测的现实操作。
五、意义与展望
兔热原试验的基本退出，不仅是检测技术进步的体现，也符合减少和替代动物实验（3R原则）的伦理发展方向。对制药企业而言，采用现代化、标准化的体外检测方法有助于提高检测效率和一致性；对社会而言，则是动物保护与公共健康兼顾的重要一步。
可以预期，随着相关替代方法的进一步完善，热原检测将在更科学、更人道的道路上持续发展。